在眾多實(shí)驗室分析實(shí)驗中，其中進(jìn)行HPLC樣品分析時(shí)，一律都采用超純水來(lái)進(jìn)行測量結果的穩定，從而來(lái)確保實(shí)驗數據的結果，那么HPLC分析實(shí)驗中，超純水有哪些作用呢?

超純水在HPLC檢測中的主要角色

①樣品溶解;

②標準樣品制備;

③作為空白試劑;

④清洗器皿。

水質(zhì)不純對HPLC檢測的影響

離子雜質(zhì)的危害：影響水的電導率和pH;與溶液中組分反應。改變吸收譜線(xiàn)，影響儀器判讀;一些離子會(huì )腐蝕儀器

有機物雜質(zhì)的危害：干擾儀器分析的背景;微生物滋生的營(yíng)養物質(zhì)。

顆粒雜質(zhì)的危害：阻塞過(guò)濾系統;損壞泵系統;吸附電荷影響離子濃度。折射光線(xiàn)影響判讀;提供細菌滋生載體。

微生物雜質(zhì)的危害：產(chǎn)生菌膜持續釋放污染物;堵塞儀器通道。

氣體雜質(zhì)的危害：影響水的離子濃度和PH值;直接參與反應。影響水有效體積;影響光學(xué)測定結果。

TOC過(guò)高的危害：靈敏度降低：移動(dòng)相中的有機分子干擾樣品峰。分析結果難以分析及重復性降低：出現unknown的peak判斷錯誤因而提高濃度：雜質(zhì)與分析物一起流出。滯留時(shí)間改變(形成復合物)雜質(zhì)與介質(zhì)非可逆性的結合導致分析時(shí)間過(guò)長(cháng)并且分辨率降低。

HPLC使用者的期望

穩定的基線(xiàn)(容易進(jìn)行面積積分)。

良好的分辨率(=分離能力)。

易辨認的對稱(chēng)性波峰。

好的波峰高度/寬度比。

穩定的洗脫時(shí)間。

為何在HPLC中要使用超純水?

用水的純度決定實(shí)驗的可控性與重復性使用超純水對于HPLC分析結果有以下優(yōu)點(diǎn)：

低顆粒物質(zhì)污染：較硬的顆粒會(huì )刮傷增壓泵,較軟的顆粒會(huì )阻塞進(jìn)入管柱前的濾膜。顆粒還可能改變樣品的組分。

低離子污染：洗脫緩沖液的穩定性好。避免腐蝕性離子影響高壓輸液泵等配件的使用壽命。

低TOC污染：改善儀器偵測靈敏性,分辨率及重復性，更穩定的滯留時(shí)間,色譜基線(xiàn)穩定及保證管柱介質(zhì)的合理使用壽命。

低微生物污染：避免管柱中出現有機分子的污染，色譜柱堵塞。低氣泡：流量穩定，基線(xiàn)平穩，避免色譜圖上出現噪聲峰，干擾分析。